编号 规格
RA1011 100g/1kg
储存条件： 室温保存
产品简介
本产品为凝胶电泳用琼脂糖，为白色粉末，制成的凝胶强度高、分辨率好，适用于对分辨率要求较高的DNA片段电泳检测和胶回收等实验。
质量指标
Gel strength (1.0%, g/cm2): >1200
EEO: ≤0.13
Gelling Range（1.5%）: 35~39℃
Melting Range（1.5%）: 87~89℃
Sulfate（%）：≤0.15
Water: ≤10.0 %
Endonuclease/ligase inhibitory factors: Not detectable
DNase, RNase, Protease: Not detectable
使用建议
由于琼脂糖的分子筛作用，不同浓度琼脂糖凝胶中，各种分子量DNA的迁移率有所不同。因而应根据所分离DNA分子大小不同，选择合适的浓度。总体原则是大片段选择低浓度凝胶，用TAE缓冲液体系电泳，而小片段选择高浓度凝胶，用TBE缓冲体系电泳。更小的片段或片段间差异很小的片段，需要考虑用PAGE胶进行电泳。
不同分子量DNA范围，推荐凝胶浓度及缓冲液如下表：
琼脂糖浓度 | 有效分离范围(bp) | 推荐缓冲液 |
0.8% | 800-10000 | 1xTAE |
1.0% | 400-8000 | 1xTAE |
1.2% | 300-7000 | 1xTAE |
1.5% | 200-3000 | 1xTAE/0.5xTBE |
2.0% | 100-2000 | 1xTAE/0.5xTBE |
3.0% | 25-1000 | 0.5xTBE |
凝胶制备方法
1. 根据凝胶浓度和体积，称取一定量的琼脂糖，加入要求体积的缓冲液，混合均匀。并大概记录溶液的液面位置。
2. 用适当的纸盖住三角瓶口，注意不能用橡皮筋封住，否则会有被烫伤的危险。
3. 用微波炉加热煮沸琼脂糖，中途适当摇动几次。适当冷却2分钟后，再次加热琼脂糖至重新沸腾。
4. 对于高浓度琼脂糖凝胶（>2.5%），额外添加10~20%的去离子水，加热后，观察多加的水是否完全蒸发，否则可以继续加热直到多加的水蒸发为止。
5. 如使用捷瑞预染DNA Marker，则制胶过程中无需加入任何染料。如需在凝胶加入核酸染料，按照染料说明进行。如涉及到EB的操作，要带好手套，进行必要的防护。
6. 选择干净的梳子和制胶槽，将冷却到适当温度的凝胶倒入制胶槽并插好梳子，室温放置，直至充分凝结为止。如果有气泡，可以在刚倒入凝胶时用吸头将气泡排除。将凝胶放入电泳缓冲液中，进行点样和电泳。
注意事项
1、 凝胶配制用三角瓶体积至少是凝胶溶液的3倍，以避免溶液沸腾溢出。
2、 凝胶配制和电泳选用相同的1x或0.5x电泳缓冲液。使用前稀释50xTAE( #T1082)或者5xTBE(#T1010)，配制成1xTAE或者0.5xTBE作为工作液注意更换不同类型的电泳缓冲液时一定要将电泳槽彻底清洗干净。
在凝胶充分凝结之前，不要拔出梳子，否则加样孔凝结不充分，影响到后续的电泳。
相关产品